Ultra HiFidelity PCR Kit

ከፍተኛ ታማኝነት ፣ ከፍተኛ ልዩነት እና ከፍተኛ ብቃት የሙቅ-ጅምር PCR premix።

Ultra HiFidelity PCR Kit ለ PCR- ተዛማጅ ክሎኒንግ እና ለይቶ ማወቅ አዲስ ከፍተኛ ታማኝነት ያለው የ PCR ማጉያ ፕሪሚክስ ነው። በመሳሪያው ውስጥ የተካተተው Ultra HiFi ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ በተመራ ሞለኪውላዊ ዝግመተ ለውጥ ቴክኖሎጂ የተገነባ አዲስ ፈጣን እና ከፍተኛ ታማኝነት ያለው የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ነው። የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬስን ወደ አብነቶች ቅርበት ያሻሽላል ፣ የኢንዛይም የማጉላት ፍጥነት እና የማራዘም ችሎታን ያሻሽላል ፣ እና የ PCR እና የምርት ምርትን የስኬት መጠን ይጨምራል።

ድመት. አይ	የማሸጊያ መጠን
4992970	1 ሚሊ
4992971	5*1ml
4992978	551ml

ኢሜል ይላኩልን

የምርት ዝርዝር

የሙከራ ምሳሌ

በየጥ

የምርት መለያዎች

ዋና መለያ ጸባያት

Operate ለመሥራት ቀላል ነው - ይህ ኪት እንደ 2 × ፕሪሚክስ የሚቀርብ ሲሆን ፒሲአር በቀላሉ አብነቶችን እና ፕሪመርዎችን በማከል ሊከናወን ይችላል።
■ ከፍተኛ ታማኝነት - ታማኝነት ከታክ ፖሊሜሬዝ 50 እጥፍ ነው።
■ ከፍተኛ ልዩነት-የምርት ልዩነትን ለማረጋገጥ እጅግ በጣም ጥሩ የሙከራ ጅምር አፈፃፀም ..
■ ፈጣን ማጉላት-የኤክስቴንሽን ፍጥነት ከ 10-15 ሰከንድ/ኪባ ሊደርስ ይችላል።
■ ጠንካራ የመለጠጥ ችሎታ - እስከ 20 ኪ.ቢ. የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ሊሰፉ ይችላሉ።
Applic ሰፊ ተፈፃሚነት -ኪት PCR Enhancer ን የያዘ እና ለከፍተኛ GC እና ለተወሳሰቡ አብነቶች ተስማሚ ነው።

ዝርዝር መግለጫ

ዓይነት: ከፍተኛ ታማኝነት ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሜሬዝ
የማጉላት ፍጥነት-10-15 ሰከንድ/ኪ.ቢ
የተቆራረጠ መጠን <20 ኪ.ባ
ትግበራዎች-ከፍተኛ ታማኝነት PCR ማጉላት ፣ የጂን ክሎኒንግ ፣ ከፍተኛ የጂሲ አብነት ማጉላት ፣ የተወሳሰቡ ጂኖዎች ጂን ክሎኒንግ ፣ ሲዲኤንኤ ከፍተኛ ታማኝነት ማጉላት ፣ SNP መለየት ፣ ጣቢያ-ተኮር ሚውቴሽን ፣ ወዘተ.
ከተለያዩ የዕፅዋት ሕብረ ሕዋሳት ዲ ኤን ኤ ማውጣት
ማሳሰቢያ -የዲ ኤን ኤ ምርት በናሙና ዓይነቶች ላይ የተመሠረተ ነው። ከላይ ያሉት ሁሉም ቁሳቁሶች ከጨረታ ቅጠሎች ናቸው።

ሁሉም ምርቶች ለ ODM/OEM ሊበጁ ይችላሉ። ለዝርዝሮች ፣እባክዎን ብጁ አገልግሎት (ኦዲኤም/ኦሪጂናል ዕቃ አምራች) ላይ ጠቅ ያድርጉ

ቀዳሚ ፦ 2 × Pfu PCR ድብልቅ

ቀጣይ ፦ QuantScript RT ኪት

	የምርት ልዩነትን ለማረጋገጥ ትኩስ ጅምር ምስል 1. የማጉላት ምርቶችን ልዩነት ለማረጋገጥ Ultra HiFi እጅግ በጣም ጥሩ ጅምር ተግባር አለው። የሞለኪዩል ቢኮኖች ዘዴ ተተግብሯል (ማ እና ሌሎች ፣ አና ባዮኬም ፣ 2006)።
	እጅግ በጣም ጥሩ ከፍተኛ ታማኝነት ፣ ከታክ ፖሊሜሬዝ በ 50 እጥፍ ይበልጣል ምስል 2. የ Ultra HiFi ታማኝነት ከተለመደው የታክ ፖሊሜሬዝ 50 እጥፍ ይበልጣል። የ Taq polymerase (ያለ እርማት እንቅስቃሴ) ፖሊመርዜሽን ታማኝነት እንደ ማጣቀሻ ጥቅም ላይ ይውላል።
	ፈጣን ማጉላት እና ረዥም ቁርጥራጮች በፍጥነት ማጉላት ይችላሉ ምስል 3. Ultra HiFi ከ 4 ኪባ በታች ለሆኑ ቁርጥራጮች እስከ 5 ሰከንድ/ኪ.ቢ. ለረጅም ቁርጥራጮች ፣ የማጉላት ጊዜ በተገቢው ሁኔታ ሊራዘም ይችላል። ከ 15 ኪ.ባ በላይ ለሆኑ ቁርጥራጮች ፣ የመጠን ፍጥነት እስከ 30 ሰከንድ/ኪባ ሊደርስ ይችላል። መ: ቲያንገን D15000 አመልካች
	ጠንካራ ሁለንተናዊነት እና ከፍተኛ ልዩነት ፣ ከፍ ያለ ጂ.ሲ. እና ከተለያዩ ምንጮች ረጅም ቁርጥራጮችን ለማንበብ ቀላል ነው ምስል 4. ለተለያዩ የአብነት ዓይነቶች የማጉላት ስኬት መጠን እና የምርት መጠን ለማረጋገጥ Ultra HiFi ከፍተኛ ልዩነት አለው። A. Ultra HiFi የማጉላት ውጤቶች B. Hi-Fi ኢንዛይም የማጉላት ውጤቶች የአቅራቢ ኬ ሐ- Hi-Fi ኢንዛይም የማጉላት ውጤቶች የአቅራቢ ኤን መ: ቲያንገን D15000 አመልካች ሌን 1-5። የተለያየ ርዝመት ያላቸው አብነቶች የማጉላት ውጤቶች - 1. 750 bp; 2. 1 ኪባ; 3. 2 ኪባ; 4. 4 ኪ.ባ; 5. 6 ኪ.ባ ሌይን 6. የከፍተኛ GC አብነት የማጉላት ውጤት - 1915 bp (GC%70%); ሌን 7-11። ከተለያዩ ጂኖም የ 2 ኪ.ቢ አብነቶች የማጉላት ውጤት - 7. አይጥ; 8. ሩዝ; 9. ስንዴ; 10. በቆሎ; 11. ባክቴሪያዎች; ሌይን 12-14። 8 ኪባ ረጅም ቁርጥራጭ የማጉላት ውጤት - 12. ሩዝ; 13. በቆሎ;

ጥ: የማጉላት ባንዶች የሉም

ሀ -1 አብነት

Template አብነቱ የፕሮቲን ቆሻሻዎችን ወይም የታክ ማገጃዎችን ፣ ወዘተ ይ containsል ——— የዲ ኤን ኤ አብነት ያፅዱ ፣ የፕሮቲን ብክለቶችን ያስወግዱ ወይም አብነት ዲ ኤን ኤን በማጣራት ኪት ያወጡ።

Of የአብነት ማካካሻ አልተጠናቀቀም ———የዲፕሬቲቭ የሙቀት መጠንን ይጨምሩ እና የደንብ ጊዜን ያራዝሙ።

■ የአብነት መበላሸት —— አብነቱን እንደገና ያዘጋጁ።

ሀ -2 ፕሪመር

Of ዝቅተኛ ጥራት ያላቸው ጠቋሚዎች —— ፕሪመርን እንደገና ማቀነባበር።

■ ፕሪሚየር ማሽቆልቆል —— ከፍተኛ ጥበቃን ለማከማቸት በትንሽ መጠን ውስጥ ይቅረጹ። ብዙ ማቀዝቀዝ እና ማቅለጥን ወይም የረጅም ጊዜ 4 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ጠብቆ ማቆየትን ያስወግዱ።

Prime ተገቢ ያልሆነ የቅድመ -ንድፍ (ለምሳሌ የመጀመርያ ርዝመት በቂ አይደለም ፣ በዲሚየር መካከል የተፈጠረ ዲሜር ፣ ወዘተ) -ፕሪሚየር አርማዎችን (ፕሪመር ዲሜር እና ሁለተኛ መዋቅር ከመፍጠር ይቆጠቡ)

ኤ -3 ሚ²⁺ትኩረት

■ ኤም²⁺ ትኩረቱ በጣም ዝቅተኛ ነው ——በመጠን Mg ይጨምሩ²⁺ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

ሀ -4 የማቅለጫ ሙቀት

High ከፍ ያለ የማብሰያው ሙቀት በፕሪመር እና በአብነት ትስስር ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል። —— የማቅለጫውን የሙቀት መጠን ይቀንሱ እና ሁኔታውን በ 2 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ደረጃ ያሻሽሉ።

ሀ -5 የኤክስቴንሽን ጊዜ

■ አጭር የማራዘሚያ ጊዜ —— የቅጥያ ጊዜን ይጨምሩ።

ጥያቄ - ሐሰተኛ አዎንታዊ

ፍኖሜና - አሉታዊ ናሙናዎች እንዲሁ የዒላማውን ተከታታይ ባንዶች ያሳያሉ።

ሀ -1 የ PCR መበከል

Target የዒላማ ቅደም ተከተል ወይም የማጉላት ምርቶች ተሻጋሪ መበከል —— —እንዲሁም የዒላማውን ቅደም ተከተል የያዘውን ናሙና በአሉታዊው ናሙና ውስጥ ላለማፍሰስ ወይም ከማዕከላዊው ቱቦ ውስጥ እንዳያፈሱ። የ reagents ወይም መሣሪያዎች ነባር ኑክሊክ አሲዶችን ለማስወገድ አውቶሞቢል መሆን አለባቸው ፣ እና የብክለት መኖር በአሉታዊ ቁጥጥር ሙከራዎች መወሰን አለበት።

■ የ reagent ብክለት —— reagents ን ያጥፉ እና በዝቅተኛ የሙቀት መጠን ያከማቹ።

ሀ -2 ፕራይምr

■ ኤም²⁺ ትኩረቱ በጣም ዝቅተኛ ነው ——በመጠን Mg ይጨምሩ²⁺ ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

Per ተገቢ ያልሆነ የመጀመሪያ ደረጃ ንድፍ ፣ እና የዒላማው ቅደም ተከተል ኢላማ ካልሆነ ቅደም ተከተል ጋር ተመሳሳይነት አለው። —— እንደገና ንድፍ አውጪዎች።

ጥ-ልዩ ያልሆነ ማጉላት

Phenomena: የ PCR ማጉያ ባንዶች ከሚጠበቀው መጠን ጋር ይጣጣማሉ ፣ ትልቅም ይሁን ትንሽ ፣ ወይም አንዳንድ ጊዜ ሁለቱም የተወሰኑ የማጉያ ባንዶች እና ልዩ ያልሆኑ የማጉያ ባንዶች ይከሰታሉ።

ሀ -1 ቀዳሚ

■ ደካማ የመጀመሪያ ደረጃ ልዩነት

—— የሪ-ንድፍ ፕሪመር።

Prim የመጀመሪያ ደረጃ ትኩረቱ በጣም ከፍተኛ ነው ——የዲፕሬቲቭ የሙቀት መጠንን በትክክል ይጨምሩ እና የዴንቴሽን ጊዜን ያራዝሙ።

ሀ -2 ሚ²⁺ ትኩረት

M ኤም²⁺ ማጎሪያ በጣም ከፍተኛ ነው ——— የ Mg2+ ትኩረትን በደንብ ይቀንሱ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

A-3 Thermostable polymerase

En ከመጠን በላይ የኢንዛይም መጠን —— በ 0.5 ዩ መካከል የኢንዛይም መጠንን በተገቢው ሁኔታ ይቀንሱ።

ሀ -4 የማቅለጫ ሙቀት

An የማቅለጫው የሙቀት መጠን በጣም ዝቅተኛ ነው ——የመቀየሪያውን የሙቀት መጠን በትክክል ይጨምሩ ወይም ባለ ሁለት-ደረጃ የማቅለጫ ዘዴን ይቀበሉ

A-5 PCR ዑደቶች

PC በጣም ብዙ የ PCR ዑደቶች —— የ PCR ዑደቶችን ቁጥር ይቀንሱ።

ጥ: ተጣጣፊ ወይም ስሚር ባንዶች

ሀ -1 ቀዳሚ——የደሃነት ልዩነት —— ፕሪሚየርን እንደገና ዲዛይን ያድርጉ ፣ ልዩነቱን ለማሳደግ የመቀየሪያውን አቀማመጥ እና ርዝመት ይለውጡ ፣ ወይም ጎጆ ያለው PCR ያከናውኑ።

ኤ -2 አብነት ዲ ኤን ኤ

—— አብነቱ ንፁህ አይደለም —— አብነቱን ያፅዱ ወይም ዲ ኤን ኤን በማጣራት ኪት ያወጡ።

ኤ -3 ሚ²⁺ ትኩረት

—— mg²⁺ ትኩረቱ በጣም ከፍ ያለ ነው ——ግ Mg ን በደንብ ይቀንሱ²⁺ ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

A-4 dNTP

—— የዲኤንቲፒዎች ትኩረት በጣም ከፍተኛ ነው—— የዲኤንቲፒ ትኩረትን በአግባቡ ይቀንሱ

ሀ -5 የማቅለጫ ሙቀት

—— በጣም ዝቅተኛ የአናኒንግ ሙቀት ——የመጠለያውን የሙቀት መጠን በትክክል ይጨምሩ

ሀ -6 ዑደቶች

—— ብዙ ዑደቶች —— የዑደት ቁጥሩን ያሻሽሉ

ጥ: በ 50 μl PCR ምላሽ ስርዓት ውስጥ ምን ያህል አብነት ዲ ኤን ኤ መጨመር አለበት?

ጥ: - ረጅም ቁርጥራጮችን እንዴት ማጉላት?

የመጀመሪያው እርምጃ ተገቢውን ፖሊመርዜሽን መምረጥ ነው። በ 3'-5 'exonuclease እንቅስቃሴ እጥረት ምክንያት መደበኛ Taq ፖሊሜሬዝ እንደገና ማንበብ አይችልም ፣ እና አለመመጣጠን ቁርጥራጮች የቅጥያ ቅልጥፍናን በእጅጉ ይቀንሳል። ስለዚህ ፣ መደበኛ ታክ ፖሊሜሬዝ ከ 5 ኪ.ባ የሚበልጡ የዒላማ ቁርጥራጮችን በብቃት ማጉላት አይችልም። Taq polymerase በልዩ ማሻሻያ ወይም በሌላ ከፍተኛ ታማኝነት ፖሊሜሬዝ የቅጥያ ቅልጥፍናን ለማሻሻል እና የረጅም ቁርጥራጭ ማጉያ ፍላጎቶችን ለማሟላት መመረጥ አለበት። በተጨማሪም ፣ ረጅም ቁርጥራጮች ማጉላት እንዲሁ የቅድመ-ንድፍ ዲዛይን ፣ የዲታቴሽን ጊዜ ፣ የኤክስቴንሽን ጊዜ ፣ ቋት ፒኤች ፣ ወዘተ ተጓዳኝ ማስተካከያ ይጠይቃል። የአብነት ጉዳትን ለመከላከል ፣ በ 94 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ላይ ያለው የዴታቴሽን ጊዜ በአንድ ዑደት ወደ 30 ሰከንድ ወይም ከዚያ በታች መቀነስ አለበት ፣ እና ከማጉላቱ በፊት ወደ 94 ° ሴ የሙቀት መጠን ከፍ ለማድረግ ጊዜው ከ 1 ደቂቃ ያነሰ መሆን አለበት። በተጨማሪም ፣ የቅጥያውን የሙቀት መጠን በ 68 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ገደማ ማዘጋጀት እና በ 1 ኪቢ/ደቂቃ መጠን መሠረት የኤክስቴንሽን ጊዜን ዲዛይን ማድረጉ የረጅም ቁርጥራጮችን ውጤታማ ማጉላት ያረጋግጣል።

ጥ: - የ PCR ማጉላት ታማኝነትን እንዴት ማሻሻል ይቻላል?

በከፍተኛ ታማኝነት የተለያዩ የዲ ኤን ኤ ፖሊሜረሎችን በመጠቀም የ PCR ማጉላት የስህተት መጠን ሊቀንስ ይችላል። እስካሁን ከተገኙት ሁሉም የታክ ዲ ኤን ኤ ፖሊሜረሎች መካከል ፣ የፉፉ ኢንዛይም ዝቅተኛው የስህተት መጠን እና ከፍተኛ ታማኝነት አለው (የተያያዘውን ሰንጠረዥ ይመልከቱ)። ከኤንዛይም ምርጫ በተጨማሪ ፣ ተመራማሪዎች የመጠባበቂያ ቅንጅትን ማሻሻል ፣ የሙቀት መቆጣጠሪያ ፖሊመሬስን ትኩረት እና የ PCR ዑደት ቁጥርን ማሻሻል ጨምሮ የምላሽ ሁኔታዎችን በማሻሻል የ PCR ሚውቴሽን መጠንን የበለጠ ሊቀንሱ ይችላሉ።

መልእክትዎን እዚህ ይፃፉ እና ለእኛ ይላኩልን