2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ

ፈጣን የ PCR ፕሪሚክስ በከፍተኛ ብቃት እና ከፍተኛ የጭንቀት መቋቋም።

2, Taq PCR MasterMix DNA ከዲ ኤን ኤ አብነት እና ከፕሪመርሮች በስተቀር በ PCR ምላሽ ውስጥ ካሉ ሁሉም አስፈላጊ ክፍሎች ጋር አዲስ የተመቻቸ እና ለአገልግሎት ዝግጁ የሆነ 2 × PCR ፕሪሚክስ ነው።

ድመት. አይ	የማሸጊያ መጠን
4993001	1 ሚሊ
4993002	5x1ml
4992912	20x5x1 ሚሊ
4992913	5 × 1ml
4992920	20 × 5 × 1ml
4992921	20 × 5 × 1ml

ኢሜል ይላኩልን

የምርት ዝርዝር

የሙከራ ምሳሌ

በየጥ

የምርት መለያዎች

ዋና መለያ ጸባያት

■ ከፍተኛ የማጉላት ብቃት - የተለያየ መጠን ያላቸው የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች (ከ 5 ኪባ በታች) እና ምንጮችን በብቃት ማጉላት ይቻላል።
■ ከፍተኛ ትብነት - እስከ 10 ፒ.ግ የዒላማ ቁርጥራጮች ከጂኖሚ አብነቶች ሊጨምሩ ይችላሉ።
Stress ከፍተኛ የጭንቀት መቋቋም-ከፍተኛ ርኩስ ይዘት ላላቸው አብነቶች እንደ ሻካራ-የተቀዳ አብነት/የባክቴሪያ ባህል ፣ የታለመው ቁርጥራጭ በቀላሉ ሊጨምር ይችላል። የ polymerase እንቅስቃሴ በተደጋጋሚ በረዶ እና ማቅለጥ አይጎዳውም።
Applications ለትግበራዎች ምቹ - የምላሽ ስርዓት በቀላሉ እና በፍጥነት ተዘጋጅቷል። የተስፋፋው ቁርጥራጭ ለ TA ክሎኒንግ ምቹ የሆነውን 3 ′ መጨረሻ dA-overhang ይይዛል።

ዝርዝር መግለጫ

ዓይነት ታክ ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሜሬዝ
ናሙና ፦ የተጣራ/ሻካራ-የወጣ አብነት/የባክቴሪያ ባህል
አብነት ፦ > 10 ገጽ
የተቆራረጠ መጠን ፦ <5 ኪ.ባ
ማመልከቻዎች PCR የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮችን ማጉላት ፣ የዲ ኤን ኤ መለያ ፣ የመጀመሪያ ደረጃ ማራዘሚያ ፣ የቅደም ተከተል መወሰን ፣ መጠነ-ሰፊ የጂን መለየት ፣ ከፊል መጠነ-መጠን PCR ሙከራዎች ፣ የመከታተያ ዲ ኤን ኤ መለየት ፣ ወዘተ.

ሁሉም ምርቶች ለ ODM/OEM ሊበጁ ይችላሉ። ለዝርዝሮች ፣እባክዎን ብጁ አገልግሎት (ኦዲኤም/ኦሪጂናል ዕቃ አምራች) ላይ ጠቅ ያድርጉ

ቀዳሚ ፦ 2 × በጂ.ሲ. የበለፀገ PCR ድብልቅ

ቀጣይ ፦ ወርቃማ ቀላል PCR ስርዓት (ከቀለም ጋር)

ምስል 1. ከተለያዩ ምንጮች አብነቶች በ TIANGEN Taq MasterMix II እና የተለመደው Taq ድብልቅ ከአቅራቢው TR በቅደም ተከተል የሬጋኖቹን የጭንቀት መቋቋም ለመለየት ተጨምረዋል። ውጤቶቹ የሚያሳዩት TIANGEN ምርቶች ከተጣራ ጂኖሚክ አብነቶች እና ከባክቴሪያ ባህል የዒላማ ቁርጥራጮችን ማጉላት ይችላሉ ፣ እና የጭንቀት መቋቋም ከአቅራቢው TR የተሻለ ነው። መ - በ TIANGEN TIANcombi ዲ ኤን ኤ ሊሴ እና ዲት ፒሲአር ኪት የተወሰደ ደረቅ የጂኖሚክ አብነት። Prp/DN: የሰው ደም ናሙናዎችን በጭካኔ ማውጣት እና ማወቅ። ሩዝ - የሩዝ ናሙናዎችን ጥሬ ማውጣት እና ማወቅ። ለ: ቅኝ ግዛት PCR. የ PCR ቁርጥራጭ 700 bp ነው።
መ: TIANGEN አመልካች III

ከተለያዩ ምንጮች እና ከተለያዩ ርዝመቶች ለአብነቶች ጥሩ ሁለንተናዊነት
ምስል 2. TIANGEN ን በመጠቀም የተለያዩ ምንጮች እና ርዝመቶች ቁርጥራጮች ተጨምረዋል ታክ MasterMix II (A) እና ተራ ታክ የአቅራቢ TK (B) ፣ የአቅራቢ TR (C) ፣ የአቅራቢ V (ዲ) እና የአቅራቢ G (ኢ) ድብልቅ። ውጤቶቹ የሚያሳዩት የ TIANGEN ምርቶች አጠቃላይ አፈፃፀም ከማጉላት ችሎታ ፣ ልዩነት እና ሁለንተናዊነት አንፃር እጅግ በጣም ጥሩ መሆኑን ነው። ኤም: TIANGEN ማርከር III1: የአኩሪ አተር ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ አብነት (120 bp);

2-3-የሩዝ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ አብነት (694 bp ፣ 2258 bp);

4: የጥጥ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ አብነት (200 bp);

5 ፦ ኤሺቺቺያ ኮላይ የጂኖሚ ዲ ኤን ኤ አብነት (2298 bp);

6-7-የመዳፊት ጂኖም ዲ ኤን ኤ አብነት (1 ኪባ ፣ 2 ኪባ);

8-10: አይጥ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ አብነት (1 ኪባ ፣ 2 ኪባ ፣ 2080 ቢፒ);

11-18: የሰው ጂኖም የዲ ኤን ኤ አብነት (300 bp ፣ 448 bp (GC%: 74.8%) ፣ 1100 bp ፣ 750 bp ፣

1000 ቢፒ ፣ 1090 ቢፒ (GC%70.4%) ፣ 2 ኪባ ፣ 4 ኪባ)

ከፍተኛ ትብነት
ምስል 3. TIANGEN ን በመጠቀም የተለያዩ የአይጥ እና የሰው ዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ተጨምረዋል ታክ MasterMix II (A) ፣ ተራ ታክ የማጉላት ስሜትን ለመለየት የአቅራቢ V (ለ) እና የአቅራቢ TK (ሲ) ድብልቅ። ውጤቶቹ TIANGEN ምርት ከጂኖም አብነት እስከ 0.01 NG ድረስ የታለመውን ቁርጥራጭ ሊያሳድግ እንደሚችል ያሳያሉ ፣ እና የእሱ ትብነት ከአቅራቢ V እና TK.M: TIANGEN ማርከር III ፣ N: NTCTemplate ግብዓት 1-8 : 200 ng ፣ 100 ng ፣ 50 ng ፣ 20 ng ፣ 10 ng ፣ 1 ng ፣ 0.1 ng ፣ 0.01 ng።

ጥ: የማጉላት ባንዶች የሉም

ሀ -1 አብነት

Template አብነቱ የፕሮቲን ቆሻሻዎችን ወይም የታክ ማገጃዎችን ፣ ወዘተ ይ containsል ——— የዲ ኤን ኤ አብነት ያፅዱ ፣ የፕሮቲን ብክለቶችን ያስወግዱ ወይም አብነት ዲ ኤን ኤን በማጣራት ኪት ያወጡ።

Of የአብነት ማካካሻ አልተጠናቀቀም ———የዲፕሬቲቭ የሙቀት መጠንን ይጨምሩ እና የደንብ ጊዜን ያራዝሙ።

■ የአብነት መበላሸት —— አብነቱን እንደገና ያዘጋጁ።

ሀ -2 ፕሪመር

Of ዝቅተኛ ጥራት ያላቸው ጠቋሚዎች —— ፕሪመርን እንደገና ማቀነባበር።

■ ፕሪሚየር ማሽቆልቆል —— ከፍተኛ ጥበቃን ለማከማቸት በትንሽ መጠን ውስጥ ይቅረጹ። ብዙ ማቀዝቀዝ እና ማቅለጥን ወይም የረጅም ጊዜ 4 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ጠብቆ ማቆየትን ያስወግዱ።

Prime ተገቢ ያልሆነ የቅድመ -ንድፍ (ለምሳሌ የመጀመርያ ርዝመት በቂ አይደለም ፣ በዲሚየር መካከል የተፈጠረ ዲሜር ፣ ወዘተ) -ፕሪሚየር አርማዎችን (ፕሪመር ዲሜር እና ሁለተኛ መዋቅር ከመፍጠር ይቆጠቡ)

ኤ -3 ሚ²⁺ትኩረት

■ ኤም²⁺ ትኩረቱ በጣም ዝቅተኛ ነው ——በመጠን Mg ይጨምሩ²⁺ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

ሀ -4 የማቅለጫ ሙቀት

High ከፍ ያለ የማብሰያው ሙቀት በፕሪመር እና በአብነት ትስስር ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል። —— የማቅለጫውን የሙቀት መጠን ይቀንሱ እና ሁኔታውን በ 2 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ደረጃ ያሻሽሉ።

ሀ -5 የኤክስቴንሽን ጊዜ

■ አጭር የማራዘሚያ ጊዜ —— የቅጥያ ጊዜን ይጨምሩ።

ጥያቄ - ሐሰተኛ አዎንታዊ

ፍኖሜና - አሉታዊ ናሙናዎች እንዲሁ የዒላማውን ተከታታይ ባንዶች ያሳያሉ።

ሀ -1 የ PCR መበከል

Target የዒላማ ቅደም ተከተል ወይም የማጉላት ምርቶች ተሻጋሪ መበከል —— —እንዲሁም የዒላማውን ቅደም ተከተል የያዘውን ናሙና በአሉታዊው ናሙና ውስጥ ላለማፍሰስ ወይም ከማዕከላዊው ቱቦ ውስጥ እንዳያፈሱ። የ reagents ወይም መሣሪያዎች ነባር ኑክሊክ አሲዶችን ለማስወገድ አውቶሞቢል መሆን አለባቸው ፣ እና የብክለት መኖር በአሉታዊ ቁጥጥር ሙከራዎች መወሰን አለበት።

■ የ reagent ብክለት —— reagents ን ያጥፉ እና በዝቅተኛ የሙቀት መጠን ያከማቹ።

ሀ -2 ፕራይምr

■ ኤም²⁺ ትኩረቱ በጣም ዝቅተኛ ነው ——በመጠን Mg ይጨምሩ²⁺ ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

Per ተገቢ ያልሆነ የመጀመሪያ ደረጃ ንድፍ ፣ እና የዒላማው ቅደም ተከተል ኢላማ ካልሆነ ቅደም ተከተል ጋር ተመሳሳይነት አለው። —— እንደገና ንድፍ አውጪዎች።

ጥ-ልዩ ያልሆነ ማጉላት

Phenomena: የ PCR ማጉያ ባንዶች ከሚጠበቀው መጠን ጋር ይጣጣማሉ ፣ ትልቅም ይሁን ትንሽ ፣ ወይም አንዳንድ ጊዜ ሁለቱም የተወሰኑ የማጉያ ባንዶች እና ልዩ ያልሆኑ የማጉያ ባንዶች ይከሰታሉ።

ሀ -1 ቀዳሚ

■ ደካማ የመጀመሪያ ደረጃ ልዩነት

—— የሪ-ንድፍ ፕሪመር።

Prim የመጀመሪያ ደረጃ ትኩረቱ በጣም ከፍተኛ ነው ——የዲፕሬቲቭ የሙቀት መጠንን በትክክል ይጨምሩ እና የዴንቴሽን ጊዜን ያራዝሙ።

ሀ -2 ሚ²⁺ ትኩረት

M ኤም²⁺ ማጎሪያ በጣም ከፍተኛ ነው ——— የ Mg2+ ትኩረትን በደንብ ይቀንሱ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

A-3 Thermostable polymerase

En ከመጠን በላይ የኢንዛይም መጠን —— በ 0.5 ዩ መካከል የኢንዛይም መጠንን በተገቢው ሁኔታ ይቀንሱ።

ሀ -4 የማቅለጫ ሙቀት

An የማቅለጫው የሙቀት መጠን በጣም ዝቅተኛ ነው ——የመቀየሪያውን የሙቀት መጠን በትክክል ይጨምሩ ወይም ባለ ሁለት-ደረጃ የማቅለጫ ዘዴን ይቀበሉ

A-5 PCR ዑደቶች

PC በጣም ብዙ የ PCR ዑደቶች —— የ PCR ዑደቶችን ቁጥር ይቀንሱ።

ጥ: ተጣጣፊ ወይም ስሚር ባንዶች

ሀ -1 ቀዳሚ——የደሃነት ልዩነት —— ፕሪሚየርን እንደገና ዲዛይን ያድርጉ ፣ ልዩነቱን ለማሳደግ የመቀየሪያውን አቀማመጥ እና ርዝመት ይለውጡ ፣ ወይም ጎጆ ያለው PCR ያከናውኑ።

ኤ -2 አብነት ዲ ኤን ኤ

—— አብነቱ ንፁህ አይደለም —— አብነቱን ያፅዱ ወይም ዲ ኤን ኤን በማጣራት ኪት ያወጡ።

ኤ -3 ሚ²⁺ ትኩረት

—— mg²⁺ ትኩረቱ በጣም ከፍ ያለ ነው ——ግ Mg ን በደንብ ይቀንሱ²⁺ ማጎሪያ -ኤምጂውን ያሻሽሉ²⁺ ጥሩውን Mg ለመወሰን ከ 1 ሚሜ እስከ 3 ሚሜ በተከታታይ ምላሾች ማጎሪያ በ 0.5 ሚሜ መካከል²⁺ ለእያንዳንዱ አብነት እና ፕሪመር ትኩረት።

A-4 dNTP

—— የዲኤንቲፒዎች ትኩረት በጣም ከፍተኛ ነው—— የዲኤንቲፒ ትኩረትን በአግባቡ ይቀንሱ

ሀ -5 የማቅለጫ ሙቀት

—— በጣም ዝቅተኛ የአናኒንግ ሙቀት ——የመጠለያውን የሙቀት መጠን በትክክል ይጨምሩ

ሀ -6 ዑደቶች

—— ብዙ ዑደቶች —— የዑደት ቁጥሩን ያሻሽሉ

ጥ: በ 50 μl PCR ምላሽ ስርዓት ውስጥ ምን ያህል አብነት ዲ ኤን ኤ መጨመር አለበት?

ጥ: - ረጅም ቁርጥራጮችን እንዴት ማጉላት?

የመጀመሪያው እርምጃ ተገቢውን ፖሊመርዜሽን መምረጥ ነው። በ 3'-5 'exonuclease እንቅስቃሴ እጥረት ምክንያት መደበኛ Taq ፖሊሜሬዝ እንደገና ማንበብ አይችልም ፣ እና አለመመጣጠን ቁርጥራጮች የቅጥያ ቅልጥፍናን በእጅጉ ይቀንሳል። ስለዚህ ፣ መደበኛ ታክ ፖሊሜሬዝ ከ 5 ኪ.ባ የሚበልጡ የዒላማ ቁርጥራጮችን በብቃት ማጉላት አይችልም። Taq polymerase በልዩ ማሻሻያ ወይም በሌላ ከፍተኛ ታማኝነት ፖሊሜሬዝ የቅጥያ ቅልጥፍናን ለማሻሻል እና የረጅም ቁርጥራጭ ማጉያ ፍላጎቶችን ለማሟላት መመረጥ አለበት። በተጨማሪም ፣ ረጅም ቁርጥራጮች ማጉላት እንዲሁ የቅድመ-ንድፍ ዲዛይን ፣ የዲታቴሽን ጊዜ ፣ የኤክስቴንሽን ጊዜ ፣ ቋት ፒኤች ፣ ወዘተ ተጓዳኝ ማስተካከያ ይጠይቃል። የአብነት ጉዳትን ለመከላከል ፣ በ 94 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ላይ ያለው የዴታቴሽን ጊዜ በአንድ ዑደት ወደ 30 ሰከንድ ወይም ከዚያ በታች መቀነስ አለበት ፣ እና ከማጉላቱ በፊት ወደ 94 ° ሴ የሙቀት መጠን ከፍ ለማድረግ ጊዜው ከ 1 ደቂቃ ያነሰ መሆን አለበት። በተጨማሪም ፣ የቅጥያውን የሙቀት መጠን በ 68 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ገደማ ማዘጋጀት እና በ 1 ኪቢ/ደቂቃ መጠን መሠረት የኤክስቴንሽን ጊዜን ዲዛይን ማድረጉ የረጅም ቁርጥራጮችን ውጤታማ ማጉላት ያረጋግጣል።

ጥ: - የ PCR ማጉላት ታማኝነትን እንዴት ማሻሻል ይቻላል?

በከፍተኛ ታማኝነት የተለያዩ የዲ ኤን ኤ ፖሊሜረሎችን በመጠቀም የ PCR ማጉላት የስህተት መጠን ሊቀንስ ይችላል። እስካሁን ከተገኙት ሁሉም የታክ ዲ ኤን ኤ ፖሊሜረሎች መካከል ፣ የፉፉ ኢንዛይም ዝቅተኛው የስህተት መጠን እና ከፍተኛ ታማኝነት አለው (የተያያዘውን ሰንጠረዥ ይመልከቱ)። ከኤንዛይም ምርጫ በተጨማሪ ፣ ተመራማሪዎች የመጠባበቂያ ቅንጅትን ማሻሻል ፣ የሙቀት መቆጣጠሪያ ፖሊመሬስን ትኩረት እና የ PCR ዑደት ቁጥርን ማሻሻል ጨምሮ የምላሽ ሁኔታዎችን በማሻሻል የ PCR ሚውቴሽን መጠንን የበለጠ ሊቀንሱ ይችላሉ።

መልእክትዎን እዚህ ይፃፉ እና ለእኛ ይላኩልን